中科院西北特色植物资源化学重点实验室/甘肃省天然药物重点实验室知识库

微生物次生代谢产物结构新颖、种类繁多，是活性先导化合物的重要来源之一。本论文以论文作者所在实验室从瑞香狼毒根际土壤分离、鉴定并筛选获得的线虫触杀活性菌株芽孢杆菌 SMrs28和伪弯头曲霉Ds03为研究对象，开展了其次生代谢产物的化学成分研究，以期发现结构新颖的微生物源活性化合物。

论文首先采用单因素法对菌株SMrs28的摇瓶发酵条件进行了优化，以发酵液的OD₆₀₀值为指标，得出菌量最多的发酵条件：发酵培养基的最优碳源和氮源分别为葡萄糖和酵母粉，发酵时间48 h，接种量10%，温度28 ℃，转速180 r/min，装液量75 mL/150 mL，初始pH 7.2。通过静态吸附法，以吸附残液和解吸液对线虫的触杀活性为指标，对大孔吸附树脂型号进行了筛选，其中D101型大孔树脂对发酵液中的活性成分的吸附和解吸效果优于XAD-4、HP20和AB-8。

运用硅胶、葡聚糖凝胶柱层析等色谱分离方法，从Bacillus sp. SMrs28 的发酵液中分离得到六个化合物，通过UV、IR、MS及1D、2D NMR 等波谱学数据分析及文献比对，确定其化学结构分别为：4-氧杂二环[3.2.2]壬-1(7),5,8-三烯(1)，(3S,8aS)-六氢-3-甲基吡咯并[1,2-a]吡嗪-1,4-二酮(2)，苯乙酰胺(3)，环(L-脯-L-缬)二肽(4)，月桂酸(5)，反式油酸甲酯(6)，以上化合物均为首次从该菌株代谢物中分离得到，其中(1)为一新骨架化合物；采用相同分离纯化与结构鉴定方法，从曲霉Aspergillus pseudodeflectus Ds03的发酵液中分离鉴定了三个化合物，其化学结构鉴定为：辛辣木-8-烯-6β,7α,11-三醇(7)，正二十六-5,8,11-三烯酸(8)，十七烷酸乙酯(9)，以上三种化合物均为首次从该菌株分离得到。

采用直接触杀法对部分分离鉴定化合物的线虫触杀活性进行了评价，其中化合物3在800 µg/mL处理72 h后对五种受试线虫表现出较强的触杀活性，化合物1和其它化合物显示弱活性。本文通过对两种植物基微生物代谢物研究，发现了新结构及线虫触杀活性化合物，为微生物资源的深层开发利用奠定了基础。